本研究选用3个梯棱羊肚菌( Morchella importuna) 的栽培菌株( F0) ，采取显微操作从其正常出菇的子囊果获得F1 单孢群体。对F1单孢群体交配型基因分型及菌丝生理特性研究，进行不同交配型的F1单孢平皿混合配对试验，筛选出杂交子。结果表明: 显微操作可以有效获得单孢菌株，成功率达35.34%。相比较MAT1/MAT2引物对，利用P8/P6引物对可以较好的鉴定出扩增出MAT1-1-1、MAT1-2-1基因，从而区分出单孢的交配型基因类型，检出率达87.5%。选取部分不同交配型的F1单孢平皿混合配对筛选出1株杂交菌株，为羊肚菌单孢杂交育种工作奠定了基础。